一.导言
本指南为行业和参与双特异性抗体开发的其他各方提供了建议。讨论包括双特异性抗体开发计划的一般考虑和建议，以及双特异性抗体开发计划背景下的法规，质量，非临床和临床考虑因素。本指南未讨论作为单克隆抗体组合或抗体混合物或多克隆抗体的其他多靶点疗法的开发考虑因素。虽然本指南特定于双特异性抗体，但本指南中讨论的原则也可适用于其他类型双特异性蛋白质产品的开发。
本指南重点关注双特异性抗体的一般法规和科学考虑，而不是特定双特异性抗体的开发。鼓励行业和其他利益相关者与FDA讨论他们个人的双特异性抗体开发计划。
一般而言，FDA的指导文件并未建立法律上可执行的责任。相反，指南描述了FDA当局目前对某一主题的看法，应仅视为建议，除非引用了具体的法规或法定要求。在机构指南中使用“应该”一词意味着建议或推荐某些内容，但不是必需的。
二、背景
A.单克隆和双特异性抗体开发
自1986年第一种治疗性单克隆抗体商业化以来，单克隆抗体已成为治疗各种疾病和病症的重要组成部分，包括但不限于癌症，自身免疫和感染性疾病以及炎症（Ecker等人，2015）。用于评估单克隆抗体的调节途径已经很好地建立，但是关于靶向多于一种抗原的基于抗体的产品需要额外的指导。技术的进步和对结合靶标的新疗法的兴趣导致双特异性抗体的开发，这些抗体是基因工程的重组抗体，其由两个不同的结合结构域组成，能够结合两种不同的抗原或相同抗原的两个不同表位。（Brinkmann和Kontermann 2017; Kontermann 2012）.
在特定疾病的治疗策略中使用两个靶标通常有很强的科学依据。双特异性抗体可以用一种药物靶向多种疾病修饰分子，可能优于联合治疗或使用抗体混合物。通过将效应细胞或效应细胞递送至特定靶标而进行免疫细胞重新靶向的可能性或通过多个靶标的参与实现协同功效的可能性使得双特异性抗体有可能促进基于抗体的疗法的发展（Suresh等人2014 ; Kontermann 2012）。在开发双特异性抗体中存在许多挑战，其中之一可能是由新表位引起的显着免疫原性。本指南解决了这些问题，并提供了有关支持双特异性抗体批准所需数据类型的建议。
B.一般考虑因素
FDA预计将会出现一系列用于预防，治疗或诊断疾病的双特异性抗体，每种抗体都对特定产品和靶向适应症有独特的考虑。在此范围内，有两大类双特异性抗体：
（1）用于桥接两种靶细胞的双特异性抗体（例如，设计用于使免疫效应细胞与特定肿瘤相关抗原紧密接触以促进细胞杀伤的双特异性抗体）。
（2）不结合两种靶细胞的双特异性抗体（例如，靶向两种可溶性细胞因子或结合相同肿瘤或病毒抗原的不同表位的双特异性抗体）。在该类别中，可能不需要双特异性抗体同时结合两种靶标的疗效。
在每个类别中，双特异性抗体开发计划都有特殊的考虑因素，包括确定两个靶标是否需要同时进行，确定每个臂对其目标的亲和力和开启和关闭率，以及在绑定两个靶标时确定潜在的协同作用。
FDA预计，与类似的单特异性产品和可用疗法相比，将有科学依据（例如，靶标，作用机制，剂量减少或安全性和/或疗效增加）以支持特定双特异性的开发抗体。为支持科学原理而提供的数据将取决于具体情况，可能来自临床或动物研究或体外试验。
C.监管考虑因素
FDA对人类固定组合处方药的规定（21 CFR 300.50）不适用于单分子双特异性抗体的开发。通常不会这样，但在某些情况下，FDA可能要求将双特异性抗体与针对相同抗原靶标的批准的单特异性产物进行比较，以告知双特异性抗体的风险 - 效益评估（参见临床研究考虑指南的第III.C.2节）。
双特异性抗体受制于生物制品的所有其他相关法律和法规，包括管理产品开发，测试和批准的那些。有关特定双特异性抗体的法规要求的问题应提交给相应的FDA临床审查部门。
三、科学考虑
双特异性抗体开发程序的许多方面与单克隆抗体开发程序类似。本节讨论化学，制造和控制（CMC）的独特方面;非临床和临床药理学;和双特异性抗体的临床开发计划。
A. CMC质量考虑因素
双特异性抗体可以以许多不同的形式存在，从串联单价结合片段到基于免疫球蛋白G（IgG）的抗体，其上附着有多个另外的抗原结合结构域。这些不同的形式允许双特异性抗体被设计为匹配所提出的作用机制和预期的临床应用（Spiess等人，2015）。
对于这些形式中的每一种，可能存在独特的开发考虑因素，例如稳定性和产量，但通常应该对产品进行表征，并且应该根据标准单克隆抗体开发实践来开发制造过程。质量属性，如抗原特异性;亲和力和开关率;亲合力（对于在同一细胞上靶向两个分子的双特异性抗体）;效力;与工艺有关的杂质，如骨料;片段/同源二聚体;稳定性;和半衰期可能会影响药理学，应该进行研究。例如，体外和体内药理学研究可以提供关于每个靶标的相对结合活性和开启和关闭速率的信息。早期的体外研究可以为选择具有最佳亲和力和稳定性的表达构建体提供信息。应评估同型二聚体的相对量。这对于效应细胞接合构建体尤其重要，其中抗CD3或抗Fc接合臂的同源二聚体可导致细胞因子释放。此外，分子结构，例如具有额外结构域的新表位或完整抗体结构，可能潜在地导致免疫原性增加。
B.非临床考虑因素
通常需要非临床研究来表征双特异性抗体的药理学和毒理学。非临床计划的范围，包括药理学研究，毒理学研究的物种选择，一般毒理学和生殖毒理学，预计与针对单一目标的单克隆抗体的范围相似。应考虑表达谱和非临床模型中每个目标的特异性，以便为双特异性产物设计适当的毒理学评估。如果有的话，可能需要解决与双特异性抗体特定成分相关的潜在安全问题;然而，通常不期望在双特异性抗体和单特异性产物之间进行比较安全性评估。
体外和体内药理学研究也可能提供生成支持双特异性抗体科学基本原理的非临床数据的机会（例如，与单特异性比较物相比，显示阻断两个靶标产生加性或协同效应;显示同时交联两种受体提供单一特异性产品无法实现的功效;对于激动性产品，显示出预期的免疫系统活化。这些研究也可用于选择首次人体（FIH）剂量。
通常，在临床试验中支持起始剂量安全性的标准非临床方法是合适的。对于具有激动特性的双特异性抗体，应考虑使用最低预期生物效应水平（MABEL）选择初始剂量。我们建议与适当的FDA临床审查部门讨论剂量选择。
C.临床考虑因素
1.临床药理学研究
双特异性抗体开发程序所需的临床药理学研究与单克隆抗体和其他治疗性蛋白质产品相似。药效学（PD）评估可能需要考虑与每个目标的结合。
由于双特异性抗体可能以生物活性和非活性形式的混合物形式存在，因此重要的是鉴定与药代动力学（PK）/ PD评估最具药理学相关性的双特异性抗体形式，并开发测量适当形式的经验证的测定法。（s）据此。有时可能需要不止一种测定来量化总的，结合的和未结合的双特异性抗体的水平（Trivedi等人2017）。
双特异性抗体具有多个结构域，其以不同方式起作用以介导临床功效。对一个域的免疫应答可以抑制特定功能，同时保持其他域完整。检查对双特异性抗体的免疫应答可能需要开发多种测定来测量对双特异性抗体的不同结构域的免疫应答。鼓励赞助商与FDA讨论针对其个别产品的特定临床药理学发展计划。
2.临床研究
在许多情况下，双特异性抗体的临床研究将比较双特异性抗体与标准治疗或安慰剂。如果批准的疗法靶向与双特异性抗体靶向的抗原相同的抗原，则有可能进行比较双特异性抗体与单特异性产物的临床研究。
将双特异性抗体与针对相同抗原靶标的批准的单特异性产物进行比较的临床试验可以告知双特异性抗体的风险 - 效益评估。如果研究可以提供关于双特异性抗体的功效或安全性的有价值信息，FDA可以要求进行此类研究。例如，如果基于动物/早期人体试验表明两种靶标都是免疫抑制的，这表明存在独特或更大的安全性问题，则将双特异性抗体与批准的单特异性产物进行比较的试验可能是合适的。此外，如果担心只有一种双特异性抗体的目标正在推动效力结果，那么与相关的单特异性产物进行比较试验可能是有用的。为支持批准而进行的研究将取决于具体目标和其他临床考虑因素。鼓励赞助商与FDA内的相应临床审查部门讨论其个别产品的开发计划。